Синтезы ЛСД и выделение алкалоидов спорыньи.

1) Предоставлено Иа

См. https://www.the-hive.ws/forum/showflat.pl?Number=345932

СИНТЕЗ:
1. гидролиз эрготамина до лизергиновой кислоты
Раствор 6,7 г KOH в 100 мл воды, в инертной атмосфере и с магнитной мешалкой, был нагрет до 75°C, и добавлено 10 г эрготамина тартрата. Реакционная смесь пожелтела при переходе эрготамина в раствор в течение приблизительно часа. Перемешивание продолжалось ещё 3 часа. Реакционную смесь охладили до приблизительно 10°C внешней ледяной баней, и подкислили примерно до pH=3.0 прикапыванием 2,5-нормальной H2SO4. В начале нейтрализации стал выпадать белый осадок; потребовалось приблизительно 60 мл серной кислоты. Прохлаждалось ночь, осадок отфильтрован, и фильтр промыт 10-ю мл эфира.

2. очистка
Сухой осадок был перенесён в лаб. стакан, растворён в 50 мл 15% аммиака в безводном этаноле, перемешивался час, и отделён декантацией. Эта экстракция была повторена, и первая decantation смешана со вторым экстрактом и профильтрована для удаления нескольких сот миллиграммов ненужных осадков. Чистый фильтрат был высушен в вакууме, остаток растворён в 50 мл 1%-го нашатырного спирта, и это раствор подкислен, как ранее, 2,5-нормальной H2SO4. Выпавший осадок отфильтрован и промыт эфиром до обесцвечивания. После вакуумной сушки до постоянного веса осталось 3.5 г d-лизергиновой кислоты гидрата, который надо хранить в тёмном закупоренном сосуде.

3. синтез ЛСД

Суспензия 3.15 г d-лизергиновой кислоты гидрата и 7.1 г диэтиламина в 150 мл CHCl3 была помещена под обратный холодильник (reflux) с перемешиванием. Без внешнего нагрева, было добавлено 3.4 г POCl3 в течение 2 мин, в темпе, соответствующем условиям. Смесь держали at reflux дополнительные 5 мин, пока всё не растворилось. После охлаждения до комнатной температуры, раствор был прилит к 200 мл однонормального NH4OH. Фазы были разделены, органическая фаза высушена над безводным MgSO4, профильтрована, и растворитель удалён под вакуумом. [хроматография - для идентификации] The residue was chromatographed over alumina with elution employing a 3:1 C6H6/CHCl3 mixture, and the collected fraction stripped of solvent under hard vacuum to a constant weight. This free-base solid can be recrystallized from benzene to give white crystals with a melting point of 87-92 °C...[-дальше пропускаю]
4. получение тартрата ЛСД

Это основание было растворено в тёплом сухом MeOH, используя 4 мл на грамм продукта. Затем была добавлена сухая d-винная кислота (0.232 грамма на грамм основания ЛСД), и в чистый тёплый раствор добавлен по каплям Et2O, пока помутнение не перестало рассеиваться при продолжающемся перемешивании. Эта непрозрачность указывает на хорошую кристаллическую взвесь (это достигается быстрее с затравкой [with seeding]) и раствор оставлен на ночь в холодильнике для кристаллизации. Во время этих процедур должна быть темнота. Продукт извлечён фильтрацией, экономно промыт холодным этанолом, холодной смесью 1:1 MeOH/Et2O, и затем высушен до постоянного веса. Белый кристаллический продукт был диэтиламида лизергиновой кислоты тартрат с двумя молекулами метанола кристаллизации, с Т пл 200 °C с разложением, и весил 3.11 г (66%).

Повторные перекристаллизации из метанола давали продукт, который становился всё менее растворимым, и в конечном счете фактически нерастворимым, с увеличением чистоты. Полностью чистая и сухая соль при встряхивании в темноте испускает маленькие вспышки белого света.

ДОЗИРОВКА: от 60 до 200 микрограммов, перорально [! микро-, а не милли-]

ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ: 8-12 часов
ПОЯСНЕНИЯ И КОММЕНТАРИИ: [часть о нестабильности пропущена; хранить в холоде, темноте, без доступа воздуха, в виде раствора соли; хлорированная вода разрушает] Разработано и описано много методов синтеза ЛСД. Все они начинаются от лизергиновой кислоты, и по этой причине это вещество находится под контролем. The amide lysergamide, компонент семян нескольких сортов "утренней славы", тоже контролируется и, по закону, является депрессантом. Самые ранние синтезы ЛСД использовали азидное промежуточное соединение (оригинальный процесс Хофманна, 1955), смешанные ангидриды с трифторуксусным ангидридом (1956) или серный ангидрид (SO3-DMF с литиевой солью, 1959), пептидный конденсирующий агент карбонилдиимидазол (1960), либо хлорид кислоты [the acid chloride - хлорангидрид?] как активное промежуточное звено с POCl3, PCl5 или тионил хлоридом (1963) либо просто оксихлорид фосфора (1973). Большинство методов неуспешны вследствие чрезмерной чувствительности к влажности, образования побочных продуктов, либо эпимеризации или инверсии на углероде в 8-й позиции до d-iso-LSD. Процедура с POCl3 быстра и чиста, и сегодня является предпочтительным процессом для синтеза широкого круга замещённых лизергамидов.

2) Метод Штолля (предоставлено Иа)

Получение (примечание 1) Раствор 0,150 г солянокислого диэтиламина-1, 1`-C^14^2 в 0,5 мл воды замораживают на стенках трубки, погруженной в баню со смесью ацетона и сухого льда. Эту трубку заполняют гранулированным едким кали и присоединяют через трубку с натронной известью к реакционной пробирке, содержащей смесь 0,400 г кристаллического азида d-изолизергиновой кислоты (примечание 2) и 4 мл диоксана, замороженной в жидком азоте (рис. II, 1). При расплавлении раствора солянокислой соли и взаимодействии со щелочью выделяется свободный амин. Смесь вновь замораживают жидким азотом, прибор эвакуируют до 10^-3 мм. рт. ст. и перегоняют диэтиламин-1,1'-С^14^2 в реакционную пробирку (в конце выдерживают смесь при температуре 40± в течение 15 мин.). Систему заполняют сухим азотом, пробирку закрывают и выдерживают при 55± в течение 2 час. Смесь испаряют в вакууме, остаток растворяют в разбавленной винной кислоте, раствор подщелачивают карбонатом натрия и экстрагируют эфиром (общий объем эфира 100 мл). Неочищенный продукт, полученный после испарения растворителя, растворяют в хлороформе и хроматографируют на окиси алюминия (40 г). Первую фракцию элюата, которая дает при ультрофиолетовом освещении интенсивно синюю флуоресценцию, испаряют досуха. При растворении в нескольких каплях этилацетата и разбовлении 20 объемами эфира получают первую порцию чистого продукта, который отфильтровывают на фильтре Гифло. Выход диамида 0.060 г; т. пл. 82-83 градуса (разл). Остатки, полученные из маточного раствора и последующих фракций, объединяют, растворяют в 5 мл абсолютного спирта и обрабатывают 0,5 мл 4 н. раствора едкого кали (примечание 3). Раствор выдерживают при комнатной температуре в течение 1,5 часа, затем подкисляют разбавленным раствором винной кислоты. концентрируют, подщелачивают бикарбонатом натрия и экстрагируют эфиром. Экстракт испаряют и остаток очищают хроматографиро-ванием; выход продукта 0,060 г. Из маточного раствора получают последнюю порцию вещества (0,020 г), причем общий выход продукта становится равным 0,140 г. Молярная удельная активность равна активности исходного соединения.

1. Этот способ синтеза основан на методе Штолля (1). Поскольку вещество неустойчиво к действию света и кислорода воздуха, его следует получать как можно быстрее (30 час.), защищая от дневного света. 2. Исходное кристаллическое вещество получают непосредственно перед опытом концентрированием эфирного экстракта раствора солянокислого азида d-изолизергиновой кислоты и бикарбоната натрия. Получение соли взаимодействием азотистой кислоты с гидразидом описано Гофманном (2). 3. N,N-бис-(Этил-1-С^14)-амид изолизергиновой кислоты в щелочном растворе перегруппировывается. Температура плавления N, N-диэтиламида d-изолизергиновой кислоты 182± (разл.) (1). Лизергиновая и изолизергиновая кислоты различаются пространственным расположением карбоксила и водородного атома в положении С-8 (3). ЛИТЕРАТУРА 1. Stoll A., Hofmann A., Helv. Chim. Acta, 26, 944 (1943). 2. Hofmann A., Helv. Chim. Acta, 30, 44 (1947). 3. Stoll A., Rutschmann J., Hofmann A., Gunthard H. H., Helv. Chim. Acta, 37, 2039 (1954).

3) И еще синтезов ! (опять-таки предоставлено Иа)

https://www.the-hive.ws/forum/showflat.pl?Number=346626

Привожу описание синтеза из статьи 43-го года.
Перевод сделан с журнала, а не с интернета.
Небольшие сокращения касаются разделения изомеров,
которое очень сложно и не нужно.
Однако сам я этого не делал, поэтому все вопросы к автору.

1. Получение гидразида изолизергиновой кислоты.
Можно использовать один из известных алкалоидов спорыньи, или их смесь. При нижеследующих условиях не расщепляются гидразином только алкалоиды типа эргобазин.
10г высушенного в высоком вакууме эрготамина нагреваются с с 10мл безводного гидразина в круглой колбе с притертым обратным холодильником на масляной бане до несильного кипения (130-140С). В течение 10мин. алкалоид полностью растворяется. Кипятить еще 20мин., затем разбавить горячий
раствор 5.6мл воды, чтобы перевести гидразин в гидразингидрат. Гидразид изолизергиновой кислоты в этой форме намного менее растворим, чем в безводном гидразине, и сразу начинает осаждаться в виде почти бесцветных кристаллов. После 15мин. дальнейшего кипячения раствор следует охладить и для завер-
шения кристаллизации дать постоять еще 6 часов. Выкристаллизовавшийся гидразид отсасывается и промывается небольшим количеством чистого спирта. Выход 3.4г (70%) почти чистого гидразида изолизергиновой кислоты. Однократная перекристаллизация из 300-кратного количества кипящего спирта, из которого соединение осаждается в виде прозрачных 6-угольных пластинок, дает аналитически чистый препарат. При 240С он нерезко плавится с разложением.

2. Превращение гидразида изолизергиновой кислоты в гидразид лизергиновой кислоты.
Гидразиды изолизергиновой кислоты можно перевести в дериваты лизергиновой кислоты как путем кипячения со спиртовой фосфорной кислотой, так и мягким действием спиртовой щелочи, причем последний путь оказался особо выгодным.
10г гидразида изолизергиновой кислоты при нагревании растворяются в 200мл чистого этилового спирта, раствор быстро выпаривается в вакууме до 40мл и тот час же, прежде, чем начнется кристаллизация, смешивается с 4мл 4-n. 50%-ной водно-спиртовой калийной щелочи. При стоянии в темноте при комнатной температуре гидразид лизергиновой кислоты через час начинает кристаллизоваться в длинные, соединяющиеся в пучки иглы. Через день превратившееся в густую кристаллическую кашу вещество отсасывается и промывается небольшим количеством чистого спирта. Выход 6г чистого гидразида лизергиновой кислоты. Гидразид лизергиновой кислоты очень трудно растворим в воде, эфире и бензоле.

3.Превращение гидразида изолизергиновой кислоты в азид.
2.82г (0.01моль) мелко измельченного (до порошка) гидразида изолизергиновой кислоты (в прохладных условиях) растворяются в 100мл 0.1n. соляной кислоты. Охлаждают до 0С и добавляют непрерывной струей 10.0мл 1n. холодного раствора нитрита натрия, после чего при интенсивном помешивании тотчас же и в течение 2-3 минут добавляют более чем 100мл 0.1n. соляной кислоты, до тех пор, пока раствор отчетливо кисло среагирует на лакмусовой бумаге. Для завершения почти моментально протекающего превращения в азид дают постоять еще 5 минут при 0С, добавляют слой из 300мл эфира, смешивают с избыточным 1n. раствором гидрокарбоната натрия и путем встряхивания переводят светло-желтые, объемистые хлопья азида в эфир. Гидрокарбонатный щелочной маточный раствор встряхивают второй раз с 50мл эфира. Соединенные эфирные растворы промываются еще 2 раза 20мл воды и потом в защищенных от света
условиях в течение 15-20мин. высушиваются при 0С прокаленным карбонатом калия.

4. Получение диэтиламида изолизергиновой и лизергиновой кислот (всегда получается смесь изомеров, хотя значительно преобладает тот из них, который был исходным).
Полученный из 1.0г гидразида изолизергиновой кислоты эфирный раствор азида смешивали с 3.0 куб.см диэтиламина и давали постоять при 20С ночь.

4) Предоставлено Трики:

Я тут был в гостях у lsdinfo.by.ru (хотел почитать его трип-репорт про триган ) и обнаружил там следующий текст (очень странно, что номер патента совпадает с тем, что постил Заратустра, но пропись другая):

Приготовление LSD (химическим путем)

Приготовление амидов лизергиновой кислоты.

Патентный Отдел США 2, 736, 728. Запатентовано: 28 февраля 1956 года.
Richard P. Pioch, Indianapolis, Indiana, assigmor, to Eli Lilly and Co.,
Indianapolis, Indiana, a corporation of Indiana. No drawing. Application December 6, 1954,
Serial No. 473,443. 10 Claims (Cl. 260-285.5)

Это открытие касается приготовления амидов лизергиновой кислоты и создания промежуточного соединения, необходимого при приготовлении лизергиновой кислоты. Хотя известны лишь несколько природных и искусственно полученных амидов лизергиновой кислоты, они обладают рядом различных полезных фармакологических свойств. Особенно полезен эргоновин, N-(1(+)-1-гидроксоизопропил)-амид d-лизергиновой кислоты, который в промышленности применяется как окислитель{?!!}.

Попытки получить амиды лизергиновой кислоты обычным способом выделения амидов, так же как и взаимодействие аминов с хлоридом лизергиновой кислоты или ее анионом ,были безуспешны. Патенты США описывают процессы получения амидов лизергиновой кислоты, хотя эти процессы эффективны как дополнение к желаемому превращению лизергиновой кислоты в один из ее амидов, они все же лишены преимуществ. Предлагаемый ниже способ достаточно простой и удобный для получения амидов лизергиновой кислоты, который позволяет провести реакцию между лизергиновой кислотой и ангидридом трихлоруксусной кислоты, чтобы получить смесь лизергиновой и трифторуксусной кислот, а затем провести взаимодействие смеси ангидридов с азотистыми соединениями, имеющими не менее одной связи водород-азот. Полученный амид лизергиновой кислоты выделяется из смеси удобным способом.

Взаимодействие лизергинового и трифторуксусного ангидридов происходит при низкой температуре, это значит, что реакция может проходить при температуре около 0° С. Предпочтителен интервал от -15° до -20° С. Этот интервал вызывает достаточно высокие температуры, чтобы реакция проходила быстро; он позволяет также принять меры предосторожности против слишком большой скорости реакции, развития слишкой высокой температуры и, следовательно, возможного нежелательного разложения смеси ангидридов.

Реакция проходит в среде соответствующего дисперсанта, который является инертным по отношению к реагентам. Лизергиновая кислота малорастворима в реагентах, пригодных для проведения реакции, поэтому она находится в виде взвеси в дисперсанте.

Требуется 2 галлона (9,0922 литра) трифторуксусной кислоты на моль лизергиновой кислоты для быстрого и полного превращения лизергиновой кислоты в смесь ангидридов. Оказалось, что молекула ангидрида связывается с одной молекулой лизергина, которая содержит основной атом азота, и это тот самый отдукт, который реагирует со второй молекулой трифторуксусного ангидрида, чтобы образовать ангидрид, находящийся в смеси с одной молекулой трифторуксусной кислоты. Превращение лизергиновой кислоты в смешанный ангидрид происходит за относительно короткое время, но, чтобы реакция прошла полностью, требуется около трех часов.

Смесь ангидридов лизергиновой и трифторуксусной кислоты относительно неустойчива, особенно при комнатной температуре, а также при более высоких температурах, поэтому ее следует хранить при низкой температуре. Термическая неустойчивость ангидрида в смеси делает желательным превращение его в лизергиновую кислоту без лишних потерь. Сам ангидрид, поскольку он содержит группу лизергиновой кислоты, также может существовать в смеси большей частью в виде аддукта в ионной форме совместно с ангидридом трифторуксусной кислоты или самой кислотой. Для максимального выхода продукта очень важно, чтобы полученная лизергиновая кислота была бы безводной. Для обезвоживания кислоты проще всего ее нагреть до 105-11О ° С в вакууме примерно 1 мм ртутного столба в течение нескольких часов, так как других подходящих способов обезвоживания кислоты нет. Превращение смешанного ангидрида в амид посредством взаимодействия ангидрида с азотистым основанием, таким, как аминогруппа, следует проводить при температурах, равных комнатной или ниже. Наиболее удобно проводить реакцию, добавляя охлажденный раствор смешанного ангидрида к аминосоединению, имеющему приблизительно комнатную температуру. Из-за того, что кислотные реагенты присутствуют в реакционной смеси в виде смешанного ангидрида, для максимально полного превращения требуется около пяти моль-эквивалентов аминогрупп на один моль-эквивалент смешанного ангидрида. Для того, чтобы смешанный ангидрид полностью вошел в реакцию, желательно в реакционную смесь дать несколько больше реагента, чем пять моль. При желании можно использовать основное соединение, способное частично нейтрализовать кислотные составляющие, находящиеся в реакционной смеси. Примером такого соединения может служить третичный амин. В этом случае примерно один моль-эквивалент аминосоединения будет превращен в амид лизергиновой кислоты, а лизергиновая кислота, не участвовавшая в реакции, может быть удалена из реакционной смеси и использована еще раз в других реакциях.

Проводится это превращение по следующему методу: Безводную лизергиновую кислоту диспергируют в подходящей среде, например, в амилнитриле, и суспензию охлаждают до -15 -20° С. В суспензию медленно добавляют раствор, содержащий примерно два моль-эквивалента трифторуксусной кислоты, предварительно охлажденный до -20° С. Смесь выдерживают при низкой температуре в течение 1-3 часов, чтобы образовалась смесь ангидридов лизергиновой и трифторуксусной кислот. Раствор смеси ангидридов добавляю к аминосоединению в количестве около пяти моль-эквивалентов для прохождения реакции. Хотя обычно аминосоединения предварительно растворяют, можно этого не делать. Реакцию с аминосоединением или его раствором следует проводить при комнатной или более низкой температуре. Реакционную смесь оставляют на 1-3 часа при комнатной температуре и желательно в темноте, а затем избыток растворителя можно удалить испарением в вакууме при температуре чуть выше комнатной. Осадок, состоящий из амида с избытком амина и его соли, вымывается хлороформом и водой. Вода отделяется от раствора хлороформа, который содержит амид; осадок много раз промывают водой, чтобы удалить избыток амина и его разнообразных солей, образовавшихся при реакции, включая и непрореагировавшую лизергиновую кислоту. Раствор хлороформа подвергается испарению, удаляя остаток амида лизергиновой кислоты. Амид, полученный таким способом, может быть легко очищен любым доступным методом. Растворители и дисперсионная среда, которые используются вами в этой реакции, должны сохранять жидкое состояние при низких температурах и иметь инертную природу, не вступая в реакции с лизергиновой кислотой и трифторуксусным ангидридом. В качестве подходящих реагентов можно предложить: амилнитрил, диметилформамид, пропилнитрил, и тому подобные. Обычно другие реагенты используются довольно редко. Из перечисленных выше веществ наиболее подходит амилнитрил, поскольку он имеет малую реакционную способность при температуре реакции, относительно летуч и легко отделяется от реакционной смеси перегонкой в вакууме. Для получения амида лизергиновой кислоты можно предложить множество азотистых оснований, подходящих для проведения реакции. Как уже было сказано, азотистое соединение должно иметь связь водород-азот, чтобы образовался амид. Для реакции можно взять следующие аминосоединения: аммиак, гидразин, первичные амины, такие как глицин, этаноламин, диглицилглицин, аминопропанол, диэтиламин, эфедрин и другие. Когда в реакцию вступают такие вещества, как аминопропанол или любой спиртосодержащий амин, при взаимодействии с ангидридами лизергиновой или трихлоруксусной кислот, продукты реакции, к несчастью, содержат также аминогруппы. Вследствие двойственной природы спиртосодержащих аминов образуются два изомера. Обычно количество примесного соединения не превышает 25-30%, от общего количества продукта реакции, но иногда это количество бывает существенно завышено. Аминогруппы очень редко можно превратить в желанный гидроксиламид, но выход продукта можно повысить, если обработать амин или его смесь с амидом спиртовым раствором щелочи, чтобы провести превращение всех компонентов в необходимый гидроксоамид. Наиболее целесообразно проводить эту реакцию растворением амино-компаунда или его смеси в минимальном количестве спирта, одновременно добавляя в раствор двукратное количество 4-нормального раствора гидроксида калия. Оставьте смесь на несколько часов при комнатной температуре, произойдет нейтрализация кислоты щелочью, а затем можно выделить и очистить амид лизергиновой кислоты.

Следует уяснить, что используемый выше термин "лизергиновая кислота" включает любой из четырех, или все четыре, стереоизомера, возможные в структуре лизергиновой кислоты. Изомеры лизергиновой кислоты можно выделить и подвергнуть превращениям по методам, известным из литературы. Эту трансформацию можно наглядно показать на следующих примерах.

Пример первый

Приготовление смеси ангидридов лизергиновой и трифторуксусной кислот:
Приготовьте суспензию из 5,36 граммов d-лизергиновой кислоты в 125 мл амилнитрила и охладите при -20° С. К суспензии добавьте охлажденный (до -20° С) раствор, содержащий 8,82 грамма трифторуксусной кислоты и 75 мл амилнитрила. Выдержите эту смесь при температуре -20° С в течение 1,5 часа для полного растворения вещества, и d-лизергиновая кислота превратится в смесь ангидридов лизергиновой и трифторуксусной кислот. Смесь ангидридов можно выделить в виде масла, если провести испарение растворителя в вакууме при температуре около нуля по Цельсию.

Пример второй

Приготовление N.N-диэтиламида d-лизергиновой кислоты:
Раствор смеси ангидридов лизергиновой и трифторуксусной кислот в 200 мл амилнитрила можно получить, если провести реакцию лизергиновой кислоты массой 5,36 г с трифторуксусной кислотой массой 8,82 г по первому методу. Амилнитрил, содержащий смесь ангидридов, следует добавить к раствору амилнитрила объемом 150 мл, содержащему 7,6 г диэтиламина. Смесь следует выдержать в темноте при комнатной температуре в течение примерно двух часов. Затем перегонкой в вакууме отделить амилнитрил от осадка; осадок содержит: "нормальные" и "изомерные" формы амида d-лизергиновой кислоты вместе с некоторым количеством лизергиновой кислоты и соль (продукт взаимодействия диэтиламина с лизергиновой кислотой и некоторое количество побочных продуктов). Осадок следует растворить в смеси 150 мл хлороформа и льда, полученного из 20 мл воды. Отделите верхний слой хлороформа и проведите экстракцию раствора пятью порциями хлороформа объемом по 50 мл. Экстракты хлороформа объедините и четыре раза промойте холодной водой (каждая порция воды имеет объем по 50 мл), чтобы удалить остаточные количества солей аминов. Затем осушите экстракт хлороформа безводным сульфатом натрия и проведите испарение хлороформа в вакууме. Таким образом, получен твердый остаток, содержащий "нормальную" и "изомерную" формы М,Н-диэтиламида d-лизергиновой кислоты, массой 3,45 г. Вещество растворите в 160 мл смеси бензина и хлороформа, взятой в соотношении 3:1 и проведите хроматографию с помощью 240 граммов оксида алюминия. Если хроматография проводится на том же растворителе, то на колонке с оксидом алюминия появятся две голубые светящиеся полоски. Зона N.N-диэтиламида d-лизергиновой кислоты будет двигаться быстрее, если пробу разбавить тем же растворителем, что использовался ранее (объем растворителя около 3000 мл); разбавление следует проводить, чтобы на хромотограмме не снижалась скорость продвижения наиболее мобильной зоны голубого окрашивания. Раствор обрабатывают лимонной кислотой для того, чтобы получить тартрат N.N-диэтил амида d-лизергиновой кислоты, который будет выделен. Тартрат N.N-диэтил амида d-лизергиновой кислоты плавится с разложением при 190-196"С. N.N-диэтил амид ди-изо-лизергиновой кислоты, который адсорбируется на колонке из оксида алюминия в виде второй флюоресцентной зоны, может быть удален растворением в хлороформе. "Изо"форма амида может быть выделена после испарения хлороформа в вакууме.

Пример третий

Приготовление амида N-диэтиламинэтил d-лизергиновой кислоты:
По методу первому готовим раствор смеси ангидридов лизергиновой кислоты и трифторуксусной кислоты из 2,68 г лизергиновой кислоты и 4,4 г ангидрида трифторуксусной кислоты, растворенных в 100 мл амилнитрила. Этот раствор следует добавить к диэтиламинэтиламину массой 6,03 г. Реакционную смесь выдерживать при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Амилнитрил испаряют, а остаток обрабатывают хлороформом, как описано в опыте втором. Обработанный осадок содержит N-диэтиламиноэтиламид d-изо-лизергиновой кислоты, его растворяют в нескольких мл этилацетата, и раствор охлаждают при температуре около О° С; в процессе охлаждения из раствора кристаллизуется N-диэтиламиноэтил d-изо-лизергиновой кислоты. Кристаллы отфильтровывают, а фильтрат упаривают с целью получить дополнительное количество кристаллического амида. После перекристаллизации объединенных фракций кристаллов можно получить N-диэтиламиноэтил d-изо-лизергиновой кислоты, плавящийся при 157-158°С. Оптическое соотношение следующее:

[x]d= +372 градуса (с.= 1.3 в пиридин)

5) Выращивание культуры спорыньи (предоставлено Иа).
Желто-коричневые шаровидные склероции диаметром 2-4мм
собирают осенью с кормового злака Paspalum dilatatum. Их
тщательно очищают щеткой, затем встряхивают в следующих
растворителях (точно соблюдая время обработки):

1. 50%-ный н-пропанол (2мин.)
2. 4%-ный раствор формалина (2мин.)
3. Стерильная дистиллированная вода (промыть 3 раза).

Затем от склероциев отделяют тонкие сегменты, их на-
носят на скошенный агар в пробирках и выдерживают при 25С.
Прорастание обычно происходит на 4-8-й день. Мицелий на ага-
ре имеет цвет от желтовато-белого до светло-коричневого, по-
верхность похожа на вату. Всхожесть склероциев- около 90%.
Через 14 дней выращивания вегетативный мицелий растира-
ют стерильно в ступке и переносят в колбу Эрленмейера на
100мл с 25мл питательной среды NL563 (или колбу на 500мл со
100мл среды).

Через 5-6 суток мицелий отделяют фильтрацией в асепти-
ческих условиях (он образует шарики коричневого цвета) и
тщательно промывают стерильной водой. Каждую 1/4 часть отмы-
того мицелия переносят в такие же колбы с таким же количест-
вом ферментационной среды NL500. После 7-суточного культиви-
рования ферментацию прекращают, мицелий отфильтровывают (его
шарики достигают размера 3-4мм, жидкость к концу ферментации
имеет цвет от светло-желтого до коричневого) и выделяют ал-
калоиды, подщелачивая культуральную жидкость и взбалтывая ее
с равным количеством хлороформа.

Содержание алкалоидов в культуральной жидкости
100-150мкг/мл, в склероциях спорыньи- 0.006%.
Состав сред:
1.Агар:
Кукурузный экстракт (твердые вещества Staley)- 10 г.
Кукурузный сироп (твердые вещества Staley) - 5 г.
Сахароза - 10 г.
KH2PO4 - 0.5г.
MgSO4*7H2O - 0.3г.
Агар - 20 г.
Дистилл. вода до 1000мл.
2.NL563 (предварительная):
Кукурузный экстракт (твердые вещества Staley)- 20 г.
Кукурузный сироп (твердые вещества Staley) - 10 г.
Сахароза - 20 г.
KH2PO4 - 1 г.
MgSO4*7H2O - 0.3г.
Дистилл. вода до 1000мл.
3.NL500 (ферментационная):
Сукцинат аммония - 30 г.
Маннит - 30 г.
KH2PO4 - 1 г.
MgSO4*7H2O - 0.3г.
1,2 пропандиол - 30 мл.
Дистилл. вода до 1000мл. (довести PH до 5.1 10%-ной со-
ляной кислотой).

(Грегер Д., Ерге Д. Образование производных лизергино-
вой кислоты в глубинной культуре claviceps paspali Stevens
et Hall. Микробиология, 1966, Т.35, Вып.4, С.606-611.)

Назад к Оглавлению